乳過(guò)氧化物酶是一種廣泛存在于動(dòng)物乳液中的重要酶,主要由乳腺內(nèi)的腺體細(xì)胞合成。乳過(guò)氧化物酶在乳中起著抗菌和抗氧化作用,能夠有效抑制多種致病微生物的生長(zhǎng)。因此,檢測(cè)乳中過(guò)氧化物酶的活性,不僅有助于評(píng)價(jià)乳品的品質(zhì),還可以作為監(jiān)測(cè)乳制品加工過(guò)程中的重要指標(biāo)。

乳過(guò)氧化物酶的主要功能包括:
1.抗菌作用:LPO在乳中與過(guò)氧化氫反應(yīng),生成的氫氧化氫(H?O?)及其他過(guò)氧化物能夠有效抑制細(xì)菌、真菌及某些病毒的生長(zhǎng),提高乳制品的安全性和保質(zhì)期。
2.抗氧化作用:LPO能夠?qū)怪|(zhì)過(guò)氧化,減緩氧化作用對(duì)乳品的損害,保持乳制品的感官品質(zhì)。
3.免疫調(diào)節(jié):通過(guò)抑制病原體生長(zhǎng),乳過(guò)氧化物酶在提高乳制品的免疫保護(hù)作用中起著關(guān)鍵作用。
1.樣品準(zhǔn)備:取乳樣進(jìn)行稀釋或加特定試劑處理,以提高酶的釋放。
2.包被抗體:將特異性抗LPO的抗體包被在96孔板中,經(jīng)過(guò)充分孵育后,用洗滌液清洗。
3.加樣:將準(zhǔn)備好的樣品加入孔中,使LPO結(jié)合于抗體表面,經(jīng)過(guò)孵育后,再次洗滌。
4.加入檢測(cè)抗體:加入與LPO結(jié)合的標(biāo)記抗體,并通過(guò)孵育形成復(fù)合物。
5.顯色反應(yīng):加入底物并在酶的催化下發(fā)生顯色反應(yīng),使用酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度。
6.數(shù)據(jù)分析:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的LPO含量。